材料与仪器

试剂、试剂盒透析缓冲液牛血清白蛋白（BSA) 或σ32 溶液仪器、耗材干净的石英比色皿分光光度计步骤

材料与设备

牛血清白蛋白（BSA) 或σ32 溶液，浓度约为 1mg/ml

干净的石英比色皿

分光光度计，可在 205nm 和 280nm 读数的

试剂

透析缓冲液

(配方，见"试剂的配制"，PP.184~189)

操作程序

1)BSA 溶液（~1mg/ml) 或未知浓度的待测纯蛋白溶液对 2X400 ml 的透析缓冲液透析 3~5 h, 充分搅拌。

2) 测定 A280nm(应在 0.25~1.0 范围内)。

3) 小心地用透析缓冲液将蛋白溶液稀释 30 倍（例如，200ul 样品加 5.8 ml 透析缓冲液)，测定 A205nm。

4) 用公式 E(1 mg/ml)205nm=27.0+120(A280/A205)，计算 E(1 mg/ml)205nm。

5) 计算：蛋白浓度=A205/E(1 mg/ml)205nm=

6) 计算：E(1 mg/1 ml)280nm=A280/蛋白浓度=来源：丁香实验